时间:2025-04-12 09:01:16
流式细胞仪使用注意事项
流式细胞仪使用注意事项包括:
1. 确保标本上机检测前的细胞浓度为1X106/ml,过低的细胞浓度会影响检测结果。
2. 使用蛋白封闭剂,封闭非特异结合位点,尤其在间接免疫荧光标记时必不可少。常用的蛋白封闭剂为0.5%牛血清白蛋白和1%胎牛血清。
3. 荧光抗体染色后充分洗涤,注意混匀和离心速度,减少重叠细胞和细胞碎片。
4. 设置对照样品,采用与抗体来源同型匹配的无关对照和荧光抗体的本底对照。
5. 判定结果时,应注意减去本底荧光,为使免疫荧光的定量分析更精确,应用计算机程序软件,用拟合曲线方法从实验组的曲线峰值中减去对照组的曲线峰值,可以得到更准确的免疫荧光定量结果。
6. 注意染色后避光,保证细胞免疫荧光的稳定。
7. 在进行DNA倍体分析时,注意标本采集、固定、单细胞悬液制备、细胞样品采集等方面的质量控制。
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